国产亚洲精品精华液,老妇性hqmaturetube,久久精品国产亚洲一区二区,高清a片在线观看

您好,歡迎進入研域(上海)化學試劑有限公司網(wǎng)站!
一鍵分享網(wǎng)站到:
  • 技術文章ARTICLE

    您當前的位置:首頁 > 技術文章 > 上海研域生物把控原代細胞能正常復蘇

    上海研域生物把控原代細胞能正常復蘇

    發(fā)布時間: 2024-11-21  點擊次數(shù): 481次

    我們都知道,細胞如果要長期保存,需要凍存起來放液氮保存。那怎么樣凍存原代細胞才能保證細胞能正常復蘇,不至于凍存死亡呢?下面我們就來講講原代細胞凍存應該注意的一些地方。


    1. 保持凍存前細胞狀態(tài)良好

    凍存前一定要保證細胞狀態(tài)良好,細胞處于對數(shù)生長期,否則不管后面怎么處理,凍存后的細胞狀態(tài)必然有影響。若細胞密度偏高,培養(yǎng)基已經(jīng)略微變黃,細胞狀態(tài)正常,需要換液培養(yǎng)2h以上再凍存細胞;若已*變黃,細胞死亡超過20%,需要傳代后再重新培養(yǎng)至狀態(tài)正常后再凍存細胞。


    2. 消化、吹打細胞按盡量輕柔

    如何正確消化、吹打細胞在前面已經(jīng)講過了,有興趣的話可以到以往文章里看看,這里就不再贅述了。凍存后細胞培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)皿肯定還是會殘留一點細胞,這些殘留的細胞加新的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如果培養(yǎng)正常就可以看出凍存時消化、吹打操作是沒有問題的,如果直接死了或者狀態(tài)不好,那凍存的細胞自然也好不到哪里去,問題出在哪就很明顯了。


    3. 凍存液配方要給合適的

    凍存液配方這個其實不同實驗室都有自己的習慣,有FBS+10%DMSO的,也有*培養(yǎng)基+10%DMSO的,還有基礎培養(yǎng)基+血清+DMSO=7:2:1 6:3:1 5:4:1,可以說是五花八門,但總體來說,DMSO一般是不超過12%的,血清濃度越高凍存效果也越好,因此需要多凍幾次對比合適的配方。


    4. 凍存液要提前配置

    凍存液使用時要提前配好,不能直接在細胞懸液中加DMSO凍存細胞,否則DMSO溶解時濃度不均加上溶解放熱會損傷細胞活性??梢袁F(xiàn)配先用,也可以多配一點,4度最多可以保存3個月,-20度可以保存一年。細胞用凍存液重懸后應盡快放到4度或者程序性凍存盒開始凍存,避免長時間室溫狀態(tài),因為室溫條件下DMSO對細胞是有害的。


    5. 凍存細胞數(shù)量選擇

    通常來說,凍存原代細胞都會有一部分細胞死亡,所以凍存剩下的活細胞數(shù)量才是決定細胞復蘇后能否正常養(yǎng)起來的關鍵。一般凍存不容易死的細胞數(shù)量每管在100-200萬就夠了,一些凍存很容易死的細胞,比如NK92、THP-1、SF9等細胞數(shù)量要稍微高點,300-400萬左右為宜。凍存液一般1ml左右每管,這個基本每個實驗室都差不多。


    6. 凍存程序選擇

    凍存的時候可以選擇用程序性凍存盒直接放到-80度凍存細胞,但要記得異丙醇要及時更換,一般用4-5次異丙醇含水量就超標了,不再適合凍存細胞使用。也可以將凍存管依次在4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。-80度不適合細胞長期保存,只能短期保存,最好不要超過一周,否則有部分細胞系活性可能會下降很厲害,長期保存的細胞最好放液氮罐保存。


    7. 注意凍存檢查

    凍存原代細胞后應在同一批次內(nèi)隨機選一只細胞復蘇檢測凍存效果, 如果復蘇效果不佳的話需要找到問題所在摸索合適條件重新凍存細胞,如果復蘇良好的就可以放到液氮里長期保存了。這個也是前面推薦將凍存剩下的細胞繼續(xù)培養(yǎng)的原因,可以有效避免細胞凍存失敗導致絕種。

產(chǎn)品中心 Products
在線客服 聯(lián)系方式

服務熱線

021-54479081
021-54461587

狠狠色综合7777久夜色撩人,| 成人区人妻精品一区二区不卡网站 | 啊轻点灬太粗太长了a片| 成全视频在线观看免费高清版 | 欧美mv日韩mv国产网站| 成人性生交大片免费看中国| 亚洲色偷精品一区二区三区| 中文字幕亚洲无线码在线一区| 精品成人a人无码亚洲成a无码| 国产人久久人人人人爽| 青楼sao货养成日记h| 优优人体大尺大尺无毒不卡| 五十路六十路老熟妇a片| 激情综合色五月丁香六月欧美| 久久综合AV色老头免费观看 | 成熟丰满熟妇xxxxx丰满| 国产裸体舞一区二区三区| chinese老女人老熟妇hd| 国产做a爱免费视频在线观看| 老根嫩草1一40淑媛全文| 小雪的13又嫩又紧又多水| 亚洲av永久无码精品水牛影视| 嫩模超大胆大尺度人体写真 | 亚洲男女一区二区三区| 国产乱人激情h在线观看| 久久久久久亚洲精品不卡| 欧洲多毛BBBBXXXX| 久久精品国产亚洲av水果派| 性高湖久久久久久久久aaaaa| 和邻居美妇疯狂作爱小说| 久久久精品人妻一区亚美研究所| 亚洲色大成网站WWW| 色欲一区二区三区精品a片| 国产精品成人无码免费| 精品爆乳一区二区三区无码av| 性少妇FREESEXVIDEOS高清| 国产我和岳拇看a片| 久久精品一区二区三区av| 门卫老头吮她的花蒂在线观看| 天堂网在线观看| 亚洲熟妇丰满多毛xxxx|