人糖磷脂酰肌醇ELISA檢測試劑盒　　　　　　　　　　　　

本試劑僅供研究使用  標(biāo)本：血清或血漿

試驗原理：
　　　　GPI試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知GPI濃度的標(biāo)準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將GPI和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中GPI的濃度呈比例關(guān)系。
　
安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

人糖磷脂酰肌醇ELISA檢測試劑盒　

操作注意事項
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準品應(yīng)丟棄，不可保存。
實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

人糖磷脂酰肌醇ELISA檢測試劑盒　

操作步驟
使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
加入稀釋好后的標(biāo)準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。

6號標(biāo)準品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準曲線無法得到的結(jié)果。

試劑盒性能
1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

人糖磷脂酰肌醇ELISA檢測試劑盒　

結(jié) 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的GPI標(biāo)準品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的GPI含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準曲線換算出相應(yīng)的濃度。

3、檢測值范圍：0-240umol/L

4、敏感度： 0.1 umol/L

Histone H3,Family 3A （HISTIH3I protein） 組氨酸三聚體核苷結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml
Histone H3,Family 3A （HISTIH3I protein） 抗組蛋白3抗體 0.2ml
Histone H1（Histone H1） 抗組蛋白3抗體 0.1ml
Histone H1b/Histone H1.4（Ac-Lys53） 抗組蛋白H1抗體 0.2ml
Histone H3-like protein 抗組蛋白H2抗體 0.2ml
Histone H3-like protein 組蛋白H3樣抗體 0.2ml
Histone H3-like protein 組蛋白H3樣抗體（Brassica junceaC端抗體） 0.2ml
HDAC1/HD1（histone deacetylase 1） 抗磷酸化組蛋白H1,4樣蛋白抗體 0.2ml
HDAC2/HD2（histone deacetylase 2） 組蛋白去乙?；?抗體 0.1ml
HDAC2/HD2（histone deacetylase 2） 組蛋白去乙酰化酶2抗體 0.2ml
HDAC3/HD3（histone deacetylase 3） 組蛋白去乙?；?抗體 0.2ml
His tag/6His/HisX6 聚組氨酸抗體/His tag標(biāo)簽抗體 0.1ml
Mouse IgM/RBITC  羅丹明標(biāo)記小鼠IgM 0.3ml
pig IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記豬IgG 0.3ml
His tag/6His/HisX6 聚組氨酸抗體/His tag標(biāo)簽抗體 0.2ml
HisX6/6His/His tag（CT） 聚組氨酸抗體/抗His tag標(biāo)簽抗體（C端 0.1ml
HisX6/6His/His tag（CT） 聚組氨酸抗體/抗His tag標(biāo)簽抗體（C端 0.2ml
FLAG Tag （NT） FLAG Tag標(biāo)簽抗體（N端） 0.1ml
FLAG Tag （NT） FLAG Tag標(biāo)簽抗體（N端） 0.2ml
FLAG Tag（CT） FLAG Tag標(biāo)簽抗體（C端 0.1ml
FLAG Tag（CT） FLAG Tag標(biāo)簽抗體（C端 0.2ml
Mink IgG/RBITC  羅丹明標(biāo)記水貂IgG 0.3ml
Rabbit IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記兔IgM 0.3ml
Rat IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記大鼠IgM 0.3ml
rHIL-1Ra/RBITC 羅丹明標(biāo)記重組人白介素-1受體拮抗劑 0.3ml
GST-Tag （glutathione-S-transferase） 谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶標(biāo)簽蛋白抗體 0.1ml
GST-Tag （glutathione-S-transferase） 谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶標(biāo)簽蛋白抗體 0.2ml
T7 tag（recombinant T7-tagged proteins polyclonal） polyclonal）T7 tag標(biāo)簽抗體 0.1ml
T7 tag（recombinant T7-tagged proteins polyclonal） polyclonal）T8 tag標(biāo)簽抗體 0.2ml
V5 tag（recombinant V5-tagged proteins polyclonal） V5 tag標(biāo)簽抗體 0.1ml
V5 tag（recombinant V5-tagged proteins polyclonal） V6 tag標(biāo)簽抗體 0.2ml
human Fibrinogen/RBITC 羅丹明標(biāo)記人纖維蛋白原 0.3ml
KLH/RBITC 羅丹明標(biāo)記血藍蛋白 0.3ml
OVA/RBITC 羅丹明標(biāo)記雞卵白蛋白 0.3ml
HSA（Human Serum albumin）/RBITC 羅丹明標(biāo)記人血白蛋白 0.3ml
KT3 tag KT3 tag標(biāo)簽抗體 0.1ml
KT3 tag KT4 tag標(biāo)簽抗體 0.2ml
VSV-G tag（vesicular stomatitis virus glycoprotein） VSV-G tag標(biāo)簽抗體 0.1ml
VSV-G tag（vesicular stomatitis virus glycoprotein） VSV-G tag標(biāo)簽抗體 0.2ml
HIV gp120 艾滋病病毒抗體 0.1ml
HIV gp120 艾滋病病毒抗體 0.2ml
HIV gp41 艾滋病病毒抗體 0.2ml
Rabbit anti-pig IgG/Gold 金標(biāo)記兔抗豬IgG（10nm/15nm） 1ml
Avidin/Gold 金標(biāo)記親合素（10nm/15nm） 0.1ml
Recomb Protein G/Gold 膠體金標(biāo)記重組蛋白G（10nm/15nm） 0.5ml
Recomb Protein G/Gold 膠體金標(biāo)記重組蛋白G（10nm/15nm） 2ml
HIV-1 ENV （gp160） antigen/envelope 艾滋病病毒-1包膜糖蛋白抗體 0.1ml
HI0.2ml
Goat anti-mouse IgG/Gold 羊抗小鼠IgG—膠體金5nm 0.5ml
Goat anti-mouse IgG/Gold 羊抗小鼠IgG—膠體金5nm 1ml
Goat anti-Rabbit IgG/Gold 羊抗兔IgG—膠體金5nm 0.5ml
HO-1/HSP32 （Hemeo xygenase 1） 血紅素氧合酶-1/熱休克蛋白-32抗體 0.1ml
HO-1/HSP32 （Hemeo xygenase 1） 血紅素氧合酶-1/熱休克蛋白-33抗體 0.2ml
HO-2 （Heme oxygenase 2） 血紅素氧合酶-2抗體 0.1ml
HO-2 （Heme oxygenase 2） 血紅素氧合酶-２抗體 0.2ml
HOXc8 同源盒基因的一種 0.2ml
HPA（heparanase） 抗乙酰肝素酶抗體 0.2ml
Rabbit anti-Goat IgG/Gold 兔抗羊IgG—膠體金5nm 0.5ml
Rabbit anti-Goat IgG/Gold 兔抗羊IgG—膠體金5nm 1ml
phospho-HP1（pTyr）（phospho-heterochromatinprotein 1）（fruit fly） 抗異染色質(zhì)蛋白1磷酸化抗體（果蠅） 0.2ml
HOXA10 （homeobox protein A10 HOXA10抗體 0.2ml
Phospho-HP1（pTyr43）（Phospho-heterochromati n protein 1）（fruit fly） 抗異染色質(zhì)蛋白1磷酸化抗體（果蠅） 0.2ml
HPV （Human papillomavirus） 人類乳頭狀瘤病毒抗體 0.2ml